黄曲霉毒素限量标准（粮食黄曲霉毒素如何检测）

黄曲霉毒素是一类由黄曲霉和寄生曲霉产生的高毒性次级代谢物，其中黄曲霉毒素 B₁（AFB₁）毒性最强，被国际癌症研究机构（IARC）列为 Ⅰ 类致癌物。其污染广泛存在于花生、玉米、坚果、食用油等农产品中，因此全球 70 多个国家和地区制定了严格的限量标准，以保障食品安全和公众健康。我国现行标准为GB 2761-2017《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》，部分关键指标如下：

1.AFB₁

花生及其制品、玉米：20 μg/kg；

大米、食用油：10 μg/kg；

其他粮食、豆类：5 μg/kg；

婴儿代乳食品：不得检出（<0.025 μg/kg）。

2.AFM₁（黄曲霉毒素 M₁）

生乳、巴氏杀菌乳：0.5 μg/kg；

婴幼儿配方奶粉：不得检出（<0.025 μg/kg）。

2024 年 12 月，中国启动 GB 2761 修订工作，拟对特殊医学用途配方食品中的真菌毒素限量进行调整，但具体数值尚未正式发布。

黄曲霉毒素如何检测呢？主要有以下几种方法：

1.薄层分析法(TLC)

TLC法是检测黄曲霉毒素最为经典的方法，也是以前最为常用的方法，至今仍为一些检测机构所用，也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样，用适宜的萃取溶剂将黄曲霉毒素从试样中萃取出来，经柱层析净化后，再在薄板上展开后分离。

利用黄曲霉毒素的荧光特性，根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量，对于一些组分很复杂的试样要双向展开，才能获得较高的灵敏度。

TLC法设备简单，检测费用低，但操作繁琐、费时，萃取和净化效果不理想，灵敏度差，对操作人员的身体健康存在较大程度的危害。

2.液相色谱法(HPLC)

HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离，再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前，该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离，其净化效果优异。

该法能准确地分离不同种类的黄曲霉毒素(例如：AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等)，检测速度快且定性与定量准确，检测限低，可作为仲裁法使用，但仪器设备价格昂贵，前处理方法相对繁琐，若用到免疫亲和柱则会使试样检测费用增加，对操作人员的身体健康仍存在一定的危害。

3.酶联免疫法(ELISA)

ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应，最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。

该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪，且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理。

4.毛细管电泳法(CE)

毛细管电泳(CE)也是一种新发展起来的分析黄曲霉素的方法。该方法与激光减弱荧光检测器(LIF)连用可很好地提高灵敏度。

Wei等用毛细管电泳一激光减弱荧光检测器测定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1，取得了较为理想的分离效果，其中对AFB2的测定最为灵敏。但CE法的成本较高，操作复杂，不适宜在试样检测中广泛应用。

5.荧光光度法(IAC/SFB)

IA C/SFB法也是一种常用的国标方法。该方法的原理是利用各种黄曲霉素的荧光特性差异用荧光光度计测定试样中黄曲霉素的含量。

该方法对检测人员身体健康无危害，检测速度迅速，灵敏度高，适用于大量试样检测，且定量准确，但检测费用较高，需要配置专用设备，且不能对单一的毒素进行检测。

6.金标试纸法

金标试纸法，实际就是一种固相免疫分析法。其原理是利用抗体与抗原的特异性结合反应，可一步检测黄曲霉素。

该法可在5～10 min内完成对试样中黄曲霉素的定性测定，具有简单、快速的特点，且无须其他仪器设备的配合，既可在实验室中进行检测，也可在现场进行实地测定，但是其检测的准确度、精度有待进一步的研究。

7.生物传感器法

生物传感器是使用固定化技术将具有分子识别能力的生物活性物质与物理化学换能器结合，可以用来探测生物体内外的环境化学物质或与之起特异性交互作用后产生响应的一种装置。其中利用分子间特异亲和性制备的亲和型生物传感器为免疫传感器口。

根据能量转换器所传导的物理或化学信号的不同，免疫传感器可分为电化学免疫传感器、光学免疫传感器、压电晶体免疫传感器等。由于生物传感器具有选择性高、响应快、操作简单、携带方便和适合于现场检测等优点，因此各国科研工作者正积极探索研制新型生物传感器用于检测黄曲霉毒素。

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