水体叶绿素a测定方法有哪些（水质叶绿素a测定步骤）

叶绿素a本身对环境没有危害，但它是估算浮游植物生物量的重要指标，可以通过测定水中浮游植物叶绿素a的含量，掌握水体的初级生产力情况和富营养化水平，在环境监测中，叶绿素a含量是评价水体富营养化的指标之一。

水体叶绿素a测定方法有哪些？

1.分光光度法

分光光度法属于光度法的一种，该分析方法采用的原理是物质分子对光具有选择吸收的特性。叶绿素a的最大吸收峰位于663nm，在一定浓度范围内，其吸光度与浓度符合朗伯-比尔定律，可根据吸光度-浓度之间的线性关系，计算叶绿素a的浓度。

2.荧光光谱法

叶绿素分子被紫外光照射后可发射出特征红色荧光，其荧光强度与叶绿素浓度呈正比，据此可釆用荧光法进行叶绿素a的定量分析。

3.色谱法

高效液相色谱(HPLC)法是一种广泛应用于化学、医药、生命科学等领域的分析手段。使用高效液相色谱法测定叶绿素a时，需要破坏测定藻类的原样，前处理方法与分光光度法的前处理方法相似。

3.遥感监测

水质遥感监测是通过监测一定波长范围内的水体辐射值，定量分析水体反射光谱特征与水质指标间的关系，进而构建水质指标反演算法的一类方法体系。遥感技术测定叶绿素a近年来已经被国内外许多学者证实具有监测范围广、速度快、成本低和便于进行长期动态监测的优势。

水质叶绿素a测定步骤（分光光度法）

1.过滤

在过滤装置上装 还玻璃纤维滤膜，根据水体的营养状态确定取样体积，用量量筒量取一定量的混匀样品，进行过滤，最后用少量蒸馏水冲洗虑器壁。

2.研磨

将样品滤膜放置于研磨装置中，加入 3~4mL丙酮溶液，研磨至糊状。补加3~4mL丙酮溶液，继续研磨，并重复1~2次，保证充分研磨5min以上。将完全破碎后的细胞提取液转移至玻璃刻度离心管中，用丙酮溶液冲洗研钵及研磨杵，一并转移入离心管中，定容至10Ml。

3.浸泡提取

将离心管中的研磨提取液充分震荡混匀后，用铝箔包好，放置于4摄氏度下避光浸泡提取2小时以上。

4.离心

将离心管放入离心机，以3000~4000r/min的速度离心10min，然后用针式滤器过滤上清液得到叶绿素a的丙酮提取液待测。

5.空白试样的配置：

用实验用水按照与试样的制备相同的步骤进行实验室空白试样的制备。

6.测定：

将试样转移至比色皿中，以丙酮溶液为参比溶液，于波长750nm、664nm、647nm、630nm处测吸光度，测定叶绿素a含量。

本文网址：https://www.huoerd.com/ask/1191.html