酶标仪是测什么的（酶标仪的工作原理）

酶标仪即酶联免疫检测仪，操作简便，被广泛应用于生命科学、生物制药、体外诊断、食品安全、环境科学等领域。传统酶标仪是指具备吸收光检测功能的酶联免疫检测仪，随着科学技术发展和市场需求不断丰富，如今酶标仪所具备的检测功能日益丰富，在光吸收检测(Abs)基础上增加了荧光强度(FI)、发光检测(Lum)、荧光偏振(FP)、时间分辨荧光(TRF)、匀相时间分辨荧光(HTRF)等多种检测技术。

酶标仪的核心原理是在微孔板中对光信号进行检测和定量，按检测模式分为光吸收、荧光、发光、荧光偏振和能量转移几类：

一、光吸收检测（Abs）

1.光源经滤光片或单色器变成单色光，进入微孔板标本。

2.光一部分被标本吸收，一部分透射到光电检测器。

3.电信号经放大、模数转换后由微处理器计算，符合朗伯比尔定律。

4.典型应用：核酸蛋白定量、ELISA、OD600细菌生长、细胞活力分析。

二、荧光强度检测（FI）

1.光源在特定波长激发荧光基团。

2.荧光分子从激发态回到基态，发射波长更长的光。

3.发射光经滤光片进入光电倍增管，以RFU表示。

4.典型应用：酶活性、荧光免疫、胞内钙流、GFP报告基因、细胞凋亡。

三、发光检测（Lum）

1.包括化学发光和生物发光，靠孔内反应自身发光，不需要激发光源。

2.背景噪音低，灵敏度比荧光高 2~3 个数量级。

3.闪光型信号亮而短，辉光型稳定而弱。

4.典型应用：荧光素酶报告基因、ATP、细胞活力、支原体检测、化学发光ELISA。

四、荧光偏振检测（FP）

1.平面偏振光激发荧光分子，分子旋转快慢决定发射光偏振程度。

2.小分子旋转快，mP值低；与大分子结合后旋转慢，mP值高。

3.典型应用：酶标仪用于受体配体研究、蛋白互作、竞争性免疫检测、激酶检测。